心痛宁冲剂中总黄酮含量测定

提要 采用比色法对心痛宁冲剂中总黄酮的含量进行测定。实验证明心痛宁冲剂中总黄酮的平均含量为17.18mg/g，回收率为99.5%，RSD=0.77%.该法简便可行，结果准确可靠，重现性好，亦可用于其它中药制剂中总黄酮的含量测定。

关键词 心痛宁冲剂；总黄酮；比色法

心痛宁冲剂为治疗冠心病及心绞痛的国家三类中药制剂，具有活血祛瘀、行气止痛、舒通心脉等功效。主药由丹参、银杏叶、槐花等十几味中药组成，含有较高的芦丁、银杏素、异银杏素、花色素等黄酮类成分。因此本文以总黄酮含量作为质控指标，采用光电比色法对心痛宁冲剂中总黄酮含量进行了测定。结果表明，该法简便可行，结果准确可靠。为控制产品质量提供可行依据。

1 仪器与试药

UV－260型紫外分光光度计（日本岛津）；芦丁对照品（由中国药品生物制品检定所提供）；心痛宁冲剂（由辽宁省中医研究院提供）。所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备：精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品100mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取10ml置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。

2.2 标准曲线绘制：精密称取芦丁对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml，分别置于25ml量瓶中，各加水至6ml，加5%的亚硝酸钠1ml，放置6min；加10%的硝酸铝溶液1ml，医学教育|网搜集整理摇匀放置6min；加氢氧化钠液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15min，照分光光度法［1］试验，在500nm波长处测得吸收度，绘制浓度－吸收度标准曲线，求得回归方程C=16.506A－1.3029（C∶0.2mg/ml），γ=0.9984，芦丁对照品在0～3mg/ml范围内含量与吸收度呈良好线性关系。

2.3 供试品溶液的制备：取供试品研细，精密称取10g，加水50ml溶解，滤过，滤液浓缩至20ml，用乙醚萃取2次（20、15ml），弃去醚液，水层浓缩近干，加甲醇少量溶解，并定量转移至100ml量瓶中，定容，精密吸取10ml置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀备用。

2.4 样品含量测定：精密量取供试品溶液5ml，置25ml量瓶中，自“加水至6ml”起，按照标准曲线项下操作，依法测定吸收度，代入回归方程，计算得心痛宁冲剂中总黄酮的平均含量为17.18mg/g，结果见表1.

表1 样品中总黄酮含量测定结果（n=3）

批 号总黄酮含量（mg/g）RSD（%）

93081516.080.81

93082017.310.67

93081618.150.83

2.5 加样回收率实验：准确称取已知含量心痛宁冲剂5g5份，分别加入一定量的芦丁对照品，依法进行测定，平均回收率为99.5%，RSD为0.77%，结果见表2.

表2 回收率测定结果（n=3）

编号加入量

（mg）测得量

（mg）回收率

（%）平均值

（%）RSD

（%）

115.715.8100.6

216.216.098.8

313.413.399.399.50.77

414.514.5100.0

517.817.698.9

2.6 稳定性考察：取芦丁对照品和心痛宁冲剂依法显色后，每隔10min测定1次吸收度。结果表明，对照品与样品分别在1h和30min内稳定。

3 讨论

3.1 本实验通过Al3+与黄酮类物质发生络合反应呈色，采用光电比色法进行含量测定，大大提高了实验的灵敏性与选择性，测得心痛宁冲剂中总黄酮的平均含量17.18mg/g，结果满意。但考虑到中药材受产地、采收季节、医学教育|网搜集整理贮存时间等影响，本实验把总黄酮含量下限拟定为16.00mg/g.

3.2 稳定性实验结果表明，心痛宁冲剂显色稳定时间较短，且30min后最大吸收峰位略有偏移，这可能同样品中黄酮类成分的纯度等诸多因素有关，故本实验显色放置15min后，应尽快测定。